本发明涉及无患子总皂苷的提取纯化方法,尤其涉及一种微生物发酵制备无患子总皂苷的方法,主要工艺步骤为:将干燥后的无患子果皮粉碎后,在25~80℃的温度下加水浸提l~24h。先后接种含量为1%~10%的经驯化后的黑曲霉和酵母菌,在20~37℃的温度下发酵2~30d,利用微生物发酵水提液中的糖类、蛋白质等营养成分,皂苷含量保持基本不变,上清液浓缩后用H2O2进行脱色处理,离心、喷雾干燥得皂苷粉(纯度大于50%),本发明为无患子总皂苷提取纯化提供一种成本低廉、工艺便捷、绿色环保、纯度较高且稳定的新方法,所得皂苷可直接用于各种洗护用品和化妆品中。